下列那一個糖化血色素（ glycated hemoglobin ）的檢測方法原理，不是利用電荷差異性？

本題觀念：

糖化血色素（HbA1c）檢測方法可依據分離原理分為「利用電荷差異性（charge-based）」與「利用結構差異性（structure-based）」兩大類。前者是根據HbA1c與非糖化血紅素帶電情形的微小差異，採用電泳或離子交換等技術分離；後者則各憑葡萄糖側鍊與特定配體（如硼酸）之專一性結合，與電荷無關。

選項分析

• 選項A 親和層析法（affinity chromatography）
  親和層析屬於結構差異性分離，利用m-aminophenylboronic acid 與HbA1c上葡萄糖cis-diol基團形成可逆共價鍵，使糖化與未糖化血紅素分流，而非仰賴電荷差異性分離(thebloodproject.com)。

• 選項B 毛細管電泳法（capillary electrophoresis）
  毛細管電泳依靠高電壓驅動下，不同帶電程度的Hemoglobin分子在毛細管內遷移速率不同，進而分離HbA1c與HbA0，屬電荷差異性分離法(cram.com)。

• 選項C 等電點電泳（isoelectric focusing, IEF）
  IEF在固定pH梯度中運用Hemoglobin等電點（pI）微小差異，使鉛酸性改變後的HbA1c在不同位置聚焦析出，屬電荷差異性分離法(cram.com)。

• 選項D 離子交換層析法（ion-exchange chromatography）
  離子交換層析利用樹脂上帶正電或負電基團與Hemoglobin相互作用強弱，依帶電量多寡分流各種血紅素成分，包括HbA1c，亦屬電荷差異性分離法(cram.com)。

答案解析

本題旨在鑑別各種HbA1c檢測法的分離原理。只有親和層析法純粹仰賴boronate–cis-diol結合的結構性差異，與分子電荷改變無關；其餘三者均根據糖化後血紅素帶電量或等電點的細微變化進行分離，故正確答案為選項A。

核心知識點

• HbA1c檢測分為
  1. 電荷差異性方法：
     a. 離子交換層析（ion-exchange chromatography）
     b. 電泳技術（electrophoresis，包括capillary electrophoresis、IEF）
  2. 結構差異性方法：
     a. 親和層析（boronate affinity chromatography）
     b. 免疫分析（immunoassay）
• 糖化反應使Hb β鏈N端valine帶入葡萄糖，增加額外負電荷，改變pI與電泳遷移度。
• Boronate親和層析利用m-aminophenylboronic acid與cis-diol間之專一性共價配位結合，定量總Glyco-Hb而非單純帶電性質。

臨床重要性

不同HbA1c測法對血紅素變異株（如HbS、HbC、HbD、HbF）或化學修飾（如尿毒症下的carbamylation）干擾程度不同。實驗室應依臨床需求及樣本類型選擇合適方法，確保結果正確且具標準化可比性。