下列何種方法較難區別 transferrin 及 carbohydrate-deficient transferrin 在體內濃度的差異？

本題觀念：

本題聚焦於各種分離分析技術對全糖基化 transferrin（Tf）與去醣 transferrin（carbohydrate-deficient transferrin, CDT）之異構體（glycoforms）區分能力。考察的技術包括：
• Size exclusion（gel filtration）—依分子大小分離；
• Isoelectric focusing（IEF）—依蛋白質等電點（pI）分離；
• Ion-exchange chromatography—依淨電荷分離；
• Mass spectrometry（MS）—依分子量/質荷比（m/z）分辨。

CDT 因缺失 sialic acid 造成負電荷減少，pI 上升，或質量略有減輕，是慢性酒精濫用之生物標記。本題要選出最難藉由方法辨別正常 Tf 與 CDT 之體內濃度差異。

選項分析

• 選項A 凝膠過濾層析（gel filtration）
  • 原理：大小排阻色層析以分子水力半徑（hydrodynamic radius）區分分子，較大分子先出柱，較小分子滯留於基質孔道中。citeturn4search7
  • Tf 分子量約80 kDa，缺失1–4個 sialic acid（每個約309 Da）所造成質量和體積變化 <1%，無法提供足夠體積差異，gel

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