112年:(醫檢)生化(2)
使用 Coomassie blue 檢測蛋白質時，應在下列何種情況進行？
A反應物對波長 280 nm 有特異性吸收
B反應需要銅離子
C在酸性環境下進行
D與芳香族支鏈結合成複合物
詳細解析
本題觀念：
本題測試對 Bradford assay（Coomassie Blue G-250 蛋白質定量）基本原理的理解。Bradford assay 利用 Coomassie Brilliant Blue G-250 在酸性環境下與蛋白質結合時產生顏色變化（由紅褐色轉為藍色），並在約595 nm 量測吸光度以估算蛋白質濃度(thermofisher.com)。
選項分析
- 選項A 「反應物對波長 280 nm 有特異性吸收」
280 nm 吸收是蛋白質中芳香族胺基酸（Tryptophan、Tyrosine）及二硫鍵的紫外吸收特性，用於直接以 UV 光度法定量蛋白質，並非 Coomassie 譜線移動產物；Bradford assay 檢測波長主要集中在 595 nm 而非 280 nm，因此此選項描述與 Coomass
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