111年:(醫檢)檢驗(2)
關於運用一步法（ one step ） real-time RT-PCR 進行登革熱病毒分型的敘述，下列何者最不適當？
A同一管進行 cDNA 合成及 PCR 反應
B減少步驟，較省時
C與ELISA分型相比，此基因分型法的敏感性較低
D熱啟動 DNA聚合酶可以增加專一性
詳細解析
本題觀念：
本題主要在考察 one-step real-time RT-PCR 在 dengue 病毒分型上的特性，包括單管反應流程、操作時間、靈敏度比較，以及熱啟動聚合酶對專一性的影響。
選項分析
- 選項A: 同一管進行 cDNA 合成及 PCR 反應
one-step RT-PCR 定義即將 reverse transcription 與 PCR 反應在同一管內完成，免去中間轉管及分段操作，符合文獻所述 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。 - 選項B: 減少步驟，較省時
因為省略了 two-step 中分別進行 cDNA 建構與 PCR 的步驟，整體作業時間明顯減少，符合 one-step 優勢 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。 - 選項C: 與 ELISA 分型相比，此基因分型法的敏感性較低
事實上 real-time RT-PCR 在急性期檢測 dengue RNA 的敏感度高於 NS1 抗原 ELISA
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