115年:營養食安(2)

安姆氏試驗(Ames test)在培養液中添加S9 mixture 的目的為何?

A評估受測物質是否具有致突變性
B評估受測物質的代謝產物是否具有致突變性
C評估受測物質是否具有組胺酸需求性
D評估受測物質的代謝產物是否具有組胺酸需求性

詳細解析

本題觀念

安姆氏試驗(Ames test)是食品毒理學中最常用的基因突變篩檢方法,用來測試化學物質是否會導致基因突變(致突變性)。這項試驗使用的是一種特殊的沙門氏菌突變株,這些菌株因為組胺酸合成基因損壞,必須靠外來的組胺酸才能存活。如果受測物質會造成基因突變,就可能讓菌株的基因「修回來」,恢復自己合成組胺酸的能力,在不含組胺酸的培養基上長出菌落。然而,很多化學物質本身並不會直接引起突變,而是要經過人體肝臟的代謝酵素轉化之後,才會變成具有致突變活性的代謝產物。為了在體外模擬這個代謝過程,試驗中會添加 S9 mixture。

選項分析

  • A:評估受測物質是否具有致突變性 不加 S9 的對照組就能直接測試原始物質本身有沒有致突變性。S9 的作用不是評估原物質的直接致突變力,而是提供代謝活化的功能,因此這個敘述不是添加 S9 的目的。

  • B:評估受測物質的代謝產物是否具有致突變性 ✅ S9 fraction 是從大鼠肝臟組織勻漿經 9000g 離心取得的上清液,含有細胞色素 P450(cytochrome P450)等第一階段代謝酵素與第二階段轉移酶。這些酵素能將「前致突變物」(promutagen,本身不致突變的物質)轉化為具有致突變活性的代謝產物。添加 S9 正是為了模擬哺乳動物肝臟代謝,評估代謝後的產物是否會造成基因突變。

  • C:評估受測物質是否具有組胺酸需求性 組胺酸需求性是試驗菌株本身的遺傳特性,與受測物質無關。菌株因組胺酸合成基因突變而需要外源組胺酸,這是試驗的偵測原理,不是 S9 要評估的項目。

  • D:評估受測物質的代謝產物是否具有組胺酸需求性 代謝產物是化學物質,不具備「組胺酸需求性」這種生物特性。組胺酸需求性只適用於描述微生物菌株的營養需求,不是化學物質的屬性。

答案解析

答案為 B。安姆氏試驗同時設有「加 S9」與「不加 S9」兩組,不加 S9 組偵測物質本身的直接致突變性,加 S9 組則是透過肝臟酵素萃取物模擬體內代謝,偵測代謝產物的致突變性。許多環境中的化學物質(如苯并芘)本身不具致突變性,但經肝臟代謝後會變成活性代謝物,才具有致突變能力。因此,添加 S9 mixture 的關鍵目的就是評估「代謝產物」是否具有致突變性。

核心知識點

  • S9 fraction 來自大鼠肝臟勻漿的 9000g 離心上清液,含細胞色素 P450 等代謝酵素
  • 安姆氏試驗同時做加 S9 與不加 S9 兩組,分別偵測代謝產物與原物質的致突變性
  • 前致突變物(promutagen)需經代謝活化才具致突變活性
  • 組胺酸需求性是菌株特性,與受測化學物質無關

參考資料