111年:(醫檢)檢驗(2)
有關自血液或骨髓抽取核酸進行分生實驗之抗凝劑的選擇,下列何者最不正確?
AEDTA( ethylenediaminetetraacetic acid )與 ACD ( acid citrate dextrose )檢體皆可萃取 DNA
BEDTA( ethylenediaminetetraacetic acid )與 ACD ( acid citrate dextrose )檢體皆可萃取 RNA
C若要萃取 RNA,則建議事先加入 RNA 穩定劑,並儘快萃取
Dheparin不會抑制 PCR 反應,適合進行後續核酸檢驗
詳細解析
本題觀念:
本題在探討從血液或骨髓檢體萃取核酸(DNA、RNA)時,常見抗凝劑對後續分子生物學實驗(尤其是PCR或RT-PCR)之適用性與影響。重點包括不同抗凝劑如何影響核酸穩定度、酶反應(Taq polymerase 或 reverse transcriptase)活性,以及檢體前處理建議。
選項分析
- 選項A
EDTA與ACD檢體皆可用於DNA萃取。
• EDTA chelate Mg²⁺以防止DNase活性,同時不干擾DNA polymerase,只要在萃取流程中補足Mg²⁺即可進行PCR。臨床與研究常用EDTA真空管收集外周血作為基因體DNA來源(cdc.gov)。
• ACD(acid citrate dextrose)中citrate同樣可chelating Ca²⁺,可抑制凝血酶酵素,又因其pH與葡萄糖組成,常用於長時間保存細胞或輸血,其檢體亦可用於高分子量DNA萃取,並在室溫或4°C條件下維持DNA完整性好於EDTA,故適合DNA萃取([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov](https://pubmed.nc
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